CellMax细胞大课堂 l 让细胞培养更容易！

1.十一要做实验啊，如果我要复苏一个细胞？

细胞复苏需要准备一个37℃水浴锅、手套、镊子，以及防护眼镜。戴上手套，用镊子夹住液氮罐中拿出的冻存管，然后快速在37℃水浴锅里化冻细胞，然后接种到预先准备好的完全培养基中！

2.培养基不够用，我能不能换一下细胞培养基啊？

千万别这么做，细胞都有各自适应的培养基，一旦更换培养条件，细胞可能无法快速适应，万一死亡了怎么办呢？

3.那更换血清呢？

换的话，尽量换同一货号的血清，毕竟不同品牌、不同货号的血清，质量不一样，所以可能会有潜在的影响，更换血清需要先做预实验，才行。

4.复苏后应不应该立马去除掉DMSO？                                                                 

有一些细胞会对DMSO敏感，一般的培养条件来说，复苏后的细胞（含有DMSO）加入完全培养基后培养，一天后再换液，可以避免复苏后细胞的生长和粘附的问题。

5.培养基到底要不要加抗生素？

其实是不推荐加抗生素的，但是很多时候，都会为了保险，加上双抗。但双抗只能抗细菌，不能抗真菌哦！

6.支原体污染是否能肉眼识别？

能，前提是你的眼睛有2000万像素，以及4000倍放大变焦功能。一般来说，污染了支原体的细胞，生长状态会变差，用肉眼基本很难判别到底是支原体污染还是你自己培养的时候在培养基里多加了一把盐...主要还是通过PCR检测或者是染色检测来区分支原体污染与否的。不过一旦污染，尽量丢弃，然后查看你的血清是否安全。

7.胰酶里为啥要加EDTA？

二价的离子会抑制胰酶活性，所以加入EDTA可以螯合掉Ca、Mg这样的二价离子，这样胰酶才能更好地发挥作用。胰酶也要注意不要反复冻融哦！

8.如何避免细胞培养过程中的污染？

主要还是考虑无菌环境，尽量做好操作台的灭菌，别把培养基滴落在生物安全柜的入风口，别在培养箱里把培养基打翻。这两个地方霉菌一旦滋生，那你就只能等着用甲醛熏蒸了。紫外无法杀灭霉菌，酒精也不行，只能用火，但是一定要注意安全。复苏的时候，水浴锅也需要进行灭菌处理。一旦出现污染，不要急，能救的就用抗生素救一下，但是一般情况下，选择原谅……不是……选择扔掉……

说到底，细胞培养究竟什么最重要呢？当然是规范的无菌操作技术和精心地呵护啦！

当然了，品质优良的细胞培养基和胎牛血清也是必不可少的啦，比如，CellMax胎牛血清！