十一、iPS品质管理——未分化标志物

rBC2LCN

rBC2LCN（AiLecS1）是将伯克霍尔德氏菌（Burkholderia cenocepacia）来源凝集素BC2L-C的N末端域通过大肠杆菌表达的重组凝集素。由于rBC2LCN对存在于人ES/iPS细胞表面的足糖萼蛋白（Podocalyxin）上的粘蛋白样O-型糖链的H3型（Fucα1-2Galβ1-3GalNAc）具有高亲和力，因此可用作人ES/iPS细胞的未分化标志物。

rBC2LCN是FUJIFILM Wako与国立研究开发法人产业技术综合研究所共同开发的产品。

（一）rBC2LCN-FITC-547/-635

本产品已进行荧光标记,可直接添加至人ES/iPS细胞的培养液中对未分化的活细胞进行染色,无需进行细胞固定(细胞在固定状态下也可进行染色)。因此也能作为检测未分化细胞的标志物使用。

人iPs细胞的活细胞染色用rBC2LCN、Tra-1-81对人iPS细胞201B7株进行无固定染色处理,2小时后确认染色图像。能够观察到rBC2LCN的活细胞染色效果更好。另外,即使在rBC2LCN-FITC24小时染色后,仍然能够清晰地观察细胞。

（二）rBC2LCN-PE23/-PE38

rBC2LCN-PE23/-PE38是绿脓菌来源外毒素的一部分(PE23/PE38)与rBC2LCN的C末端域融合而成的重组蛋白,直接添加至人ES/iPS细胞培养液中即可杀伤人ES/iPS细胞。由于死亡的细胞会悬浮在培养液中,因此通过更换培养基便可实现人ES/iPS细胞的清除。

人iPS细胞的清除(rBC2LCN-PE23)，疾病患者来源的人iPS细胞能够被分化为间充质干细胞,将rBC2LCN-PE38添加至混合有人iPS细胞和间充质干细胞的培养液中,调整最终浓度为10ug/mL。24小时后人iPS细胞的细胞团开始溶解,48小时后人iPS细胞基本被清除。另一方面,间充质干细胞在添rBC2LCN-PE38的48小时后也未受到影响,细胞依然存活。

人iPS细胞的清除(StemSure® hPSC未分化干细胞清除剂)向人iPS细胞201B7株和人成纤维细胞的培养液中加入StemSure® hPSC未分化干细胞清除剂(最终浓度为0.1ug/mL)，培养48小时。之后更换培养基,再培养24小时。其结果如下图(右)所示,经过StemSure® hPSC未分化干细胞清除剂处理的人iPS细胞基本被清除。

• ES/iPS相关专题：

一、iPS维持培养——StemSure® 人多能干细胞培养基：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1339

二、iPS维持培养——MF登记低分子化合物：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1340

三、iPS维持培养——细胞分散溶液：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1341

四、iPS维持培养——细胞外基质：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1342

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六、iPS维持培养——细胞因子：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1344

七、iPS维持培养——培养器材：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1345

八、iPS分化诱导——小分子化合物：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1346

九、iPS分化诱导——无动物源细胞因子：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1347

十、人ES/iPS细胞的清除：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1348

十一、iPS品质管理——未分化标志物：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1349

十二、iPS品质管理——内毒素检测：http://www.ny-bio.com/cn/nd.jsp?id=1350