海星生物：小鼠小胶质细胞(BV2)细胞培养要点

BV2小鼠小胶质细胞，来源于1990年，应用携带癌基因v-raf/v-myc的反转录病毒J2感染原代培养的小鼠小胶质细胞而获得的永生细胞系。免疫组化结果显示BV2为MAC1、MAC2阳性，而MAC3、胶质细胞原纤维酸性蛋白、半乳糖脑苷脂为阴性。且是高度纯化的永生细胞系，同时该细胞系具备了原代培养的小胶质细胞的形态学、表型以及各项功能特点，相较于原代培养的细胞而言，永生化的细胞系培养起来更为容易。因此目前被广泛的运用于科研究当中。

细胞简称：BV2

产品货号：TCM-C718

种属来源：小鼠

组织来源：脑

细胞形态：多形型

生长特性：半贴壁半悬浮生长

培养体系：DMEM-H+10%FBS+1%P/S

配套培养基货号：TCM-G718

传代比例：1:3-1:6，每2-3天换液一次

传代周期：48-72 h

培养条件：气相：95%空气+5%CO2，温度：37℃

冻存条件：60%基础培养基+30%FBS+10%DMSO，液氮储存

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BV2细胞特性

多形型细胞，半贴壁半悬浮生长，因此它的形态是不规则的，存在圆形和梭形两种形态。圆形的多为悬浮形态，细胞状态良好时边缘光滑、折光度高，贴壁细胞则既有圆形也有梭形，有短触角或凸起伸出。但如果出现大量细胞脱壁或完全呈现贴壁形态的情况都应引起重视，及时反思培养过程，看是否存在问题。

BV2细胞注意事项

1.BV2细胞对培养条件较敏感，当培养基出现过酸或者过碱的情况时都会出现脱壁现象，尤其是在培养基过碱时，会出现快速脱壁的现象。因此在培养过程中需关注细胞培养基的酸碱度，当培养基颜色呈现粉紫色时，PH值大概率偏高，需及时收集培养皿中的悬浮细胞，进行离心换液，更换为新鲜的完全培养基。若使用的是培养瓶，应注意瓶口是否为透气瓶口，若不是带有透气口的款式，在使用时应拧松瓶口，保证瓶内CO₂浓度为细胞正常生长所需浓度。

2.BV2细胞在培养过程中也会出现，圆形悬浮形态的越来越少，有触角的贴壁形态越来越多的情况。这种状况的出现往往也伴随着细胞增殖越来越慢甚至是停止生长的现象。这是因为相较于梭形细胞，圆形细胞的增值速度较快，因此在圆形细胞数量减少的情况下就会伴随出现增殖缓慢的情况。BV2为半贴壁半悬浮细胞，而圆形细胞大多数为悬浮形态，因此在换液及传代时应将细胞悬液收集，降低圆形细胞的损失。

3.BV2细胞易出现分化现象，分化后的细胞贴壁更牢，极难消化，因此应尽量缩短消化时间，预防细胞分化。若已经出现严重分化的情况，则可以尝试通过轻柔的吹打将部分细胞吹下来，并悬浮细胞一起收集，无法吹打下来的细胞直接舍弃，从而降低细胞的分化程度。但吹打时也要切记，不可暴力吹吸，避免对细胞造成机械刺激。

总体来说，细胞的状态与其生长环境以及培养方式息息相关，在培养过程中应按规程处理细胞，时时关注细胞的状态，如遇问题，及时调整。