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MBL：3个应用案例：HLA-E四聚体助力免疫学研究 二维码
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发表时间：2024-08-27 13:17作者：诺扬生物 HLA-E是非经典的HLA-Ⅰ类分子中的重要成员之一。与经典MHC分子类似，非经典的HLA-E同样参与机体的“自己/非己”识别及免疫应答过程。在免疫系统中，HLA-E不仅可以作为NK细胞和CD8⁺T细胞表面CD94和NKG2A/C的配体介导细胞生物学功能，而且可以提呈抗原表位给CD8⁺T细胞的TCR识别，介导CD8⁺T细胞应答，在免疫应答中起重要作用。在日本及中国南方汉族人群中，其等位基因以HLA-E*01:01和HLA-E*01:03占主导地位。 HLA-E在免疫应答中的作用 HLA-E可通过结合表达于NK细胞或CD8⁺T细胞上的CD94/NKG2受体，从而抑制相应细胞的免疫应答反应。HLA-E在黑色素瘤、骨肉瘤等多种肿瘤细胞中均有表达。这些肿瘤细胞可通过HLA-E结合NK细胞或CD8⁺T细胞的抑制性受体CD94/NKG2，从而逃避免疫监测。研究表明，HLA-E偏好与来源于HLA-A, -B, -C前导肽的多肽序列（第3~11aa）结合。在生理条件下，加载了HLA-Ⅰ类分子前导肽的HLA-E可与NK细胞及CD8⁺T细胞的CD94/NKG2A受体结合，通过启动抑制性信号通路来降低细胞的杀伤毒性。 除此之外，HLA-E亦可结合来自病原体、肿瘤以及自身抗原等的多种抗原表位，并将其提呈给CD8⁺T细胞的TCR从而促进其激活过程。  （HLA-E作用机制示意图） MBL HLA-E Tetramer可助力您的研究 HLA-E在天然免疫以及获得性免疫的调节中均发挥重要作用。越来越多研究表明，HLA-E分子与造血干细胞移植效果、肿瘤免疫、生殖免疫、机体抗感染显著关联，HLA-E相关研究已成为当前免疫遗传学研究热点之一。MBL可提供多种HLA-E四聚体工具，为您的免疫学研究提供助力，产品详情如下表所示：  MBL HLA-E Tetramer应用案例 实验例1 HLA-E(HLA-A leader₃₋₁₁)/ HLA-E(Negative)四聚体染色 以健康供体的PBMC作为待测样本，分别使用HLA-A前导肽段及阴性肽段对应的HLA-E*01:03四聚体(货号TS-ME01-1和TS-ME02-1)对其进行流式染色。结果显示使用阳性四聚体HLA-E*01:03 HLA-A leader₃₋₁₁进行染色时，四聚体⁺/CD8⁻及四聚体⁺/CD8⁺象限中均有细胞检出。散点图中数字代表四聚体阳性细胞在各实验组淋巴细胞中所占比例。
实验例2 抗CD94抗体介导的 HLA-E四聚体的结合抑制 分离健康供体PBMC后，使用抗CD94抗体(cloneDX22)进行预封闭后再使用HLA-E*01:03 HLA-A leader₃₋₁₁四聚体进行流式染色。 结果显示，抗CD94抗体的引入，抑制了CD8⁻及CD8⁺细胞群通过CD94/NKG2受体与HLA-E四聚体的结合。特别是，使用抗CD94抗体封闭后仍可检出一部分四聚体⁺/CD8⁺细胞，提示了有部分细胞可通过CD94/NKG2以外的受体识别并结合HLA-E四聚体。 每幅散点图右上方数字表示四聚体阳性细胞在总淋巴细胞中所占比例，括号内的数字表示四聚体阳性细胞在总CD8⁺细胞中所占比例。
实验例3 抗CD3抗体介导的 HLA-E四聚体的结合抑制 分离获得健康供体PBMC并使用抗CD3抗体进行预封闭清洗后加入抗小鼠lgG二抗进行孵育 。 再次对细胞清洗后，加入抗CD94抗体(clone DX22)进行孵育并使用HLA-E*01:03 HLA-A leader₃₋₁₁四聚体进行流式染色。 经抗CD3抗体+抗小鼠lgG二抗封闭后，于A、B样本中均可见HLA-E四聚体与细胞TCR/CD3复合物结合减少的现象。 散点图中数字代表四聚体阳性细胞在总CD8⁺细胞中所占比例。
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