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DNA甲基化分析的完整解决方案

发布时间:2020-06-29



甲基化概述


       甲基化是蛋白质和核酸的一种重要的修饰,调节基因的表达和关闭,与癌症、衰老、老年痴呆等许多疾病密切相关,是表观遗传学的重要研究内容之一。 最常见的甲基化修饰有DNA甲基化和组蛋白甲基化。DNA甲基化能关闭某些基因的活性,去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。


甲基化检测方法:


       基本原理在于:样本经亚硫酸盐处理后,甲基化的胞密啶(C)保持不变,但非甲基化的胞嘧啶被转化成脲嘧啶,因此在利用该处理产物作为模板的PCR产物中,甲基化的胞嘧啶还是胞密啶,但非甲基化胞嘧啶变成了脲嘧啶(U)或者胸腺嘧啶(T),此时检测到的胞嘧啶(C)即是样品中本身的甲基化位点。



Zymo Research – DNA甲基化分析的完整解决方案


       Zymo于1994年成立于美国加州Orange County,主要研发和生产表观遗传学系列产品和常用分子生物学试剂盒,其DNA甲基化,羟甲基化,核酸提取等产品已得到世界各顶级实验室的认可,产品具有“快速、简便、超纯”的特点。
Zymo甲基化产品线已被上千次引用在各大主流学术刊物上,包括NATURE、SCIENCE 、PNAS、Stem Cells、 Nucleic Acids Res等;迄今,EZ DNA Methylation™系列产品作为DNA重亚硫酸盐处理(DNA甲基化分析前处理)的的金标准,已成为最畅销和引用次数最多的产品。


——全球最受好评的重亚硫酸盐转化试剂盒


产品1 - EZ DNA Methylation™ Kits (转化率>99%)

该试剂盒已被Illumina, Sequenom, Nimblegen,Agilent,Roche等公司整合入其标准化工作流程中

品名规格货号价格优惠价
EZ DNA Methylation™ Kit (柱子)

Column, 50 Rxns, 200 Rxns

D5001
D5002

1973
6792

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EZ-96 DNA Methylation™ Kit (96孔板高通量)Shallow-Well, 2 x 96 RxnsD5003
D5004

5434

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Deep-Well, 2 x 96 Rxns

5434

EZ-96 DNA Methylation MagPrep (高通量磁珠法)4x96 rxns, 8x96 rxnsD5040
D5041

8594
13728

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产品2 - EZ DNA Methylation™-Gold Kits (转化率>99%)

该试剂盒是目前最受欢迎的重亚硫酸盐转化试剂盒,小于3小时转化时间

品名

规格

货号

价格

优惠价

EZ DNA Methylation-Gold™ Kit (柱子)

50 Rxns, 200 Rxns

D5005
D5006

2116
7107

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EZ-96 DNA Methylation-Gold™ Kit (96孔板高通量)

Shallow-Well, 2 x 96 Rxns

D5007
D5008

5591

咨询

Deep-Well, 2 x 96 Rxns

5591

EZ-96 DNA Methylation-Gold MagPrep (高通量磁珠法)

4x96 rxns, 8x96 rxns.

D5042
D5043

8880
14157

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产品3 - EZ DNA Methylation™-Direct Kits (转化率>99.5%)

该试剂盒可直接以细胞(≥10个细胞),血液和组织(FFPE)作为起始模板,并适合低样本起始量(10个细胞 或 50pgDNA)

品名

规格

货号

价格

优惠价

EZ DNA Methlyation-Direct™ Kit (柱子)

50 Rxns, 200 Rxns

D5020
D5021

2760
7822

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EZ-96 DNA Methlyation-Direct™ Kit (96孔板高通量)

Shallow-Well, 2 x 96 Rxns

D5022
D5023

6320

咨询

Deep-Well, 2 x 96 Rxns

6320

EZ-96 DNA Methylation-Direct MagPrep (高通量磁珠法)

4x96 rxns, 8x96 rxns.

D5044
D5045

9952
16101

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产品4 - EZ DNA Methylation™-Lightning Kits (转化率>99.5%)
该试剂盒可达最快的1小时处理时间,彻底完成DNA的转化

品名

规格

货号

价格

优惠价

EZ DNA Methlyation-Lightning Kit(柱子)

50 Rxns, 200 Rxns

D5030
D5031

2760
7822

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EZ-96 DNA Methylation-Lightning Kit(96孔板高通量)

Shallow-Well, 2 x 96 Rxns

D5032
D5033

6320

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Deep-Well, 2 x 96 Rxns

6320

EZ-96 DNA Methylation-Lightning MagPrep(高通量磁珠法)

4x96 rxns, 8x96 rxns.

D5046
D5047

9952
16101

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图注:经重亚硫酸盐处理后的DNA测序表明:位点5的甲基胞嘧啶保持不变,而未甲基化的胞嘧啶(如:位点7,9,11,14和15)在重亚硫酸盐处理后被完全转化为尿嘧啶,并在PCR扩增后以胸腺嘧啶被检测到。


产品5 - EZ RNA Methylation Kit (转化率>99%)

品名

规格

货号

价格

优惠价

EZ RNA Methylation Kit

50 prep, 200 prep

R5001
R5002

2702
8565

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•该产品为首款商品化的RNA重亚硫酸盐转化试剂盒
•配套Zymo Direct-zol™ RNA MiniPrep (Cat.No. R2050, R2052) 使用,效果杠杠的!
•转化得到的RNA可用于RT-PCR, sequencing, library preparation and Next-Gen sequencing等

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——优质DNA标准品 - 精确定量DNA甲基化程度


Universal Methylated DNA Standards

•使用甲基化和未甲基化DNA对照,精确测定重亚硫酸盐转化效率
•与Zymo所有重亚硫酸盐转化产品兼容

品名

规格

货号

价格

优惠价

Human Methylated & Non-Methylated DNA Set

1 Set

D5014

6220

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Human WGA Methylated & Non-Methylated DNA Set

1 Set

D5013

5019

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Universal Methylated Human DNA Standard

20rxns

D5011

2960

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Universal Methylated Mouse DNA Standard

20rxns

D5012

2960

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图注:使用M.Sssl 甲基化酶测定的完全甲基化。
来源于HCT116 DKO细胞的非甲基化和甲基化的DNA经Mspl 和 Hpall 限制性内切酶消化处理。Mspl可消化非甲基化和甲基化的DNA,而Hpall只能消化非甲基化DNA,无法消化CpG的甲基化。

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——5-mC & 5-hmC ELISA Kits -灵敏的5-mC和5-hmC定量


•适用于基因组DNA中5-mC和5-hmC的高通量全局检测
•整个工作流程最快可在3小时内完成

品名

规格

货号

价格

优惠价

5-mC DNA ELISA Kit

1 x 96 Preps

D5325

6048

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2 x 96 Preps

D5326

9609

Quest 5-hmC™ DNA ELISA Kit

1 x 96 Preps

D5425

6048

咨询

2 x 96 Preps

D5426

9607


图注:5-mC DNA ELISA Kit可定量检测来自于众多样本来源DNA中 5-mC程度(%),其结果与LC-MS检测样本结果密切关联。

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——其他甲基化研究相关试剂


品名

规格

货号

价格

优惠价

Anti-5 hmC Polyclonal Antibody

25ug/25ul
50ug/50ul
200ug/200ul

A4001-25
A4001-50
A4001-200

1387
2388
7679

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Methylated – DNA IP Kit

10 Rxns

D5101

6821

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OneStep qMethyl™ Kit

44 tests

D5310

6442

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OneStep qMethyl™ - Lite

44tests

D5311

6075

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Quest 5-hmC Detection Kit (includes Mspl GSRE)

25 preps
50 preps

D5410
D5411

4794
7759

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Quest 5-hmC Detection-Lite Kit (GSRE not included)

25 preps
50 preps

D5415
D5416

3843
6075

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CpG Methylase (M.Sssl)

200U
400U

E2010
E2011

3264
5386

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CpG Methylase (M.CviPI)

200U
1000U

E2014
E2015

1326
5304

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5-hmC Glucosyltransferase

100 units
200 units

E2026
E2027

1787
2960

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ZymoTaq DNA Polymerase

50 rxns
200rxns

E2001
E2002

1044
3260

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ZymoTaq PreMix

50 rxns
200rxns

E2003
E2004

1044
3260

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更多甲基化系列产品请登录www.zymoresearch.com或咨询诺扬生物0571-86893171

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常见问题解答:


Q:在用Zymo的重亚硫酸盐试剂盒处理前,起始DNA样本应该储存在TE,水,还是其他缓冲液中?
A:水和TE缓冲液均可用来储存DNA,并且不会对转化过程造成干扰。


Q: 为什么使用EZ DNA Methylation-Direct Kit,我的DNA没有得到完全的转化?
A: 1) 如果是固体样本,很可能是处理的样本量过大,而导致不完全DNA转化;
2)如果是FFPE组织样本,有可能是DNA已大规模受损以及/或者交联,导致不完全转化;
3)如果在Proteinase K消化后,没有通过离心去除碎片,则可能会干扰重亚硫酸盐转化过程,导致DNA的不完全转化;


Q: 为什么EZ-96 DNA Methylatioin 甲基化(96孔板)产品线有两种不同的目录号?
A: 这两种不同的目录号是用来区分试剂盒内不同类型的96孔板。深孔板和浅孔板均适用于大多数离心机和微板架。如下阐释了这两类96孔板的区别:


Silicon-A

Zymo-Spin I-96

款式

浅孔

深孔

尺寸(H x W x L)

19 mm x 83 mm x 125 mm

35 mm x 83 mm x 125 mm

结合/收集板组合高度

43 mm

60 mm

结合力/最小洗脱体积

5µg/30µl per well

5µg/15µl per well

货号

D5003, D5007, D5022, D5032

D5004,D5008, D5023, D5033


Q: Zymo 重亚硫酸盐处理试剂盒与illumina技术平台兼容吗?
A: 是的,Zymo的EZ DNA Methylation Kit技术被illumina推荐使用在其GoldenGate和Infinium Assays平台上;



Q: 用Zymo的EZ DNA Methylation Kit转化得到的DNA可用作哪些下游分析应用?
A: 用Zymo的任何一款EZ DNA Methylation kit转化得到的DNA,可完美适用于后续的各类权威测序分析法,Ms-SNuPE, COBRA, Bisulfite-PCR, MSP, Bisulfite-sequencing, mass spectroscopy (如: Sequenom的EpiTYPER), 以及其他分析方法。














杭州诺扬生物技术有限公司 是一家专注于生命科学和生物技术领域的企业。主要经营免疫学,细胞生物学,分子生物学,蛋白质研究各类试剂,及相关生化试剂、进口耗材。我们代理多家著名公司的优质产品,同时不断完善自身的供应体系,致力于为用户提供专业的一站式服务。 诺扬生物 是四正柏,博奥森bioss,Cellmax(赛澳美),康为世纪,GVS,MBL,WAKO(和光),雅酶,友康生物,Cosmo Bio,Gene-tools,PEVIVA,ZYMO,sumitomo bakelite(住友),三博特,百奥迈科,三菱化学,shibayagi等浙江省独家代理,是ENZO,AdipoGen,ThermoFisher,SIGMA,麦迪康,Macklin等的浙江省特约代理