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无血清细胞冻存和传统细胞冻存专题

发布时间:2016-08-01

一、无血清细胞冻存液相关产品:无需程序降温,-80℃长期保存


品牌编号/货号品名规格单价优惠价备注
wako039-23511CultureSure无血清通用细胞冻存液(优选)100ml9309302-10℃ 2年
wako302-14681BambankerTM无血清细胞冻存液120ml15702-8℃ 2年
wako306-14684BambankerTM无血清细胞冻存液5*20ML14702-8℃ 2年
wako306-95921BambankerTM Direct 无血清培养基20ML6002-8℃ 1年
雅酶BY002快速细胞冻存液(无血清)100mL3982-8℃ 1年
雅酶BY002P免分装快速细胞冻存液(无血清)5mL×203982-8℃ 1年


产品介绍:

       传统的细胞冻存遵循缓冻速融原则,细胞+DMSO+血清,然后-4度30分钟—— -20度1-2小时—— -80度过夜——沉入液氮,或者使用程序降温盒

      而Wako旗下无血清即用型细胞冻存液,无需程序性降温,可在-80℃长期保存细胞。节省血清、节省购买程序降温和液氮所需的昂贵费用,最关键的可以节省您的宝贵实验时间!
         

二、传统细胞冻存部分产品


品牌编号/货号品名规格单价
诺扬Y16475细胞培养级 二甲基亚砜 DMSO(Dimethyl sulfoxide)纯度:≥99.9%50ML240
SigmaD2650-5X5ML细胞培养级 二甲基亚砜 DMSO 
Hybri-Max™, sterile-filtered, BioReagent, suitable for hybridoma, ≥99.7% (Sigma)
5*5ml557.26
SigmaD2650-5X10ML5*10ml861.3
SigmaD2650-100ML100ml1577.54
NALGENEY2116程序降温盒18孔380
corning430658VIAL,1.2ML,CB,SS,EXT,PP,S,BK,5 冻存管 1.2ml 锥形底 自立式 外旋密盖 PP(聚丙烯)材质 灭菌 大包装 硅胶垫圈50个/包90
corning430659VIAL,2.0ML,RB,SS,EXT,PP,S,BK,5
冻存管 2.0ml 圆底 自立式 外旋密盖 PP(聚丙烯)材质 灭菌 散装 硅胶垫圈
50个/包89
corning430663VIAL,5.0ML,RB,SS,EXT,PP,S,BK,5
冻存管 5.0ml 圆底 自立式 外旋密盖 PP(聚丙烯)材质 灭菌 大包装 硅胶垫圈
50个/包110
corning430487VIAL,1.2ML,CB,SS,INT,PP,S,BK,5 冻存管 1.2ml锥心底 自立式 内旋密盖 PP(聚丙烯)材质 灭菌 大包装 硅胶垫圈50个/包113
corning430488VIAL,2.0ML,RB,SS,INT,PP,S,BK,5
冻存管 2.0ml 圆底 自立式 内旋密盖 PP(聚丙烯)材质 灭菌 大包装 硅胶垫圈
50个/包97


部分产品图片


    


二甲基亚砜(DMSO) 产品介绍

       一种含硫有机化合物,常温下为无色的透明液体,是一种吸湿性的可燃液体。具有高极性、高沸点、热稳定性好、非质子、与水混溶的特性,能溶于乙醇、丙醇、苯和氯仿等大多数有机物,被誉为“万能溶剂”。 过滤除菌时不能使用醋酸纤维素膜,而应该使用尼龙膜。

在细胞冻存中的应用:

       二甲基亚砜是一种重要的渗透型细胞保护剂。在深低温(零下200度)保存细胞时冻存过程中,为防止细胞内液冰晶形成、渗透压改变、细胞结构紊乱等导致的损伤,有必要使用含有DMSO冷冻保护剂。DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中,降低冰点、延缓冻存过程,同时提高细胞内离子浓度,减少细胞内冰晶的形成,从而减少细胞损伤。深低温时二甲基亚砜的细胞毒性受到抑制。复苏时动作要快,尽快洗掉二甲基亚砜,否则会造成对细胞严重的毒性。二甲基亚砜(DMSO)是目前最好的细胞冻存保护剂,但也是一种以细胞毒性很大的化学试验剂。研究结果表明,培养液中DMSO浓度为10%时,细胞生长抑制率近100%;1‰浓度时抑制率为35%,即使是0.04‰的浓度,DMSO对细胞的生长也有不利的影响。


细胞冻存参考步骤

配制冷冻培养基:含有细胞培养用培养基、10-20% 血清和5-10% DMSO;

用胰酶或其他合适的方法消化贴壁细胞;(细胞最好处于对数增长期)

低速离心(4 °C,250 × g, 10min)收集细胞,吸去培养基;

用冷冻培养基悬浮细胞,使细胞密度为106 -107 cells/ml;

平均分配细胞,装入冻存管内;

依照标准冻存程序冷冻细胞,冻存在-70 °C 或更低的温度内;
    4度30分钟—— -20度1-2小时—— -80度过夜——沉入液氮,或者使用程序降温盒。

注意事项:

仅用于实验室。要制备滤膜除菌的DMSO溶液,推荐使用teflon或nylon膜,尽量不用醋酸纤维素膜。








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