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PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD)

发布时间:2017-05-12

PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG POD

PS Capture™ Exosome ELISA Kit (Anti Mouse IgG POD)


培养物上清的外泌体定性·定量分析


◆特点

 

采用PS结合分子Tim4包被板


● 通过磷脂酰丝氨酸(PS)结合分子进行捕捉。※1

● 可检测出0.1μL培养上清液细胞外囊泡。

● 用纯化细胞外囊泡为标准品※2进行定量检测。

● 可通过WB※3进行501,000倍高灵敏度检测。

↓↓

培养上清的细胞外囊泡高灵度定性·定量检测

※1比通过抗体包被板ELISA法能更好进行外囊泡的定性·定量分析。

※2请使用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS获得外囊泡标准品。

※3WB法:免疫印迹实验


最优化试剂盒

● 最优化对照用一抗※4

● 最优化检测用二抗※5

● 采用显色法

↓↓

操作简便,实验重复性高

※4附加抗人CD63抗体。检测其他表面标记蛋白可利用任意小鼠单抗。

※5附加抗小鼠IgG抗体-HRP标记。


◆测定原理·产品概述

      本试剂盒含有细胞培养上清和体液样品纯化外囊泡定性分析,以及细胞上清样品外囊泡定量分析作用的酶联免疫测定试剂。将能与外囊泡表面的磷脂酰丝氨酸(PS)特异性结合的蛋白包被到板上,细胞外囊泡与其反应固定后,用任意外囊泡表面标记蛋白的小鼠单抗作为检测一抗,试剂盒的HRP标记小鼠IgG抗体为二抗,可高灵敏度检测表面具有任意标记蛋白的细胞外囊泡。另外,试剂盒含有作为控制组检测一抗的抗人CD63小鼠单抗,可检测出人CD63阳性外囊泡。

       通过MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS(Code No.: 293-77601)提纯细胞培养上清和体液样品中的外囊泡,通过本试剂盒对细胞外囊泡的表面标记蛋白进行免疫印迹实验,可50~1,000倍高灵敏度且简便进行检测。另外,从细胞上清中利用MagCapture™ Exosome Isolation Kit PS获得外囊泡作为标准品,可对细胞上清外囊泡进行定量分析。



◆试剂盒组成


试剂盒组成(96次)

包装

捕获外泌体96孔板

1个(8well×12strips)

反应/洗涤缓冲液(10×)

50mL×2瓶

外泌体结合增强子(100×)

10mL×1瓶

对照一抗Anti-CD63(100×)

120μL×1瓶

二抗HRP缀合抗小鼠IgG(100×)

120μL×1瓶

TMB溶液

12mL×1瓶

终止液

12mL×1瓶

封板膜

4个

说明书

1本


◆案例


各种细胞培养上清纯化外囊泡定性分析


     将各种细胞获得的纯化外囊泡1ng添加至板孔中,利用能检测表面标记蛋白CD9/CD63/CD81的一抗通过本试剂盒对各表面标记量进行定性比较。

     另外,作为比较参考数据,将各细胞纯化150ng外囊泡进行电泳,利用能检测表面标记的CD9/CD63/CD81的一抗对各表面标记蛋白量进行定性分析。


正常人血清纯化细胞外囊泡的定性分析

    将从正常人血清的6个样品纯化的细胞外囊泡,通过BCA检测外囊泡膜上的蛋白浓度。分别添加40、20、10ng到孔中,用可识别表面标记CD63的对照组检测一抗测定OD值进行定性比较。


使用从体液样品纯化的细胞外囊泡具有良好的线性!!

细胞培养上清纯化细胞外囊泡的检测灵敏度参考数据



COLO201细胞培养上清纯化外囊泡,比较本试剂盒和免疫印迹实验的检测灵敏度。

免疫印迹实验和ELISA的检测灵敏度比较

      (a),(b)使用各种抗CD63抗体(其他公司产品,Wako产品:Code No. 012-27063)进行免疫印迹实验检测灵敏度数据

  样品:COLO201细胞培养上清纯化外囊泡(MagCaptureTMExosome Isolation Kit PS纯化)

  ★:各抗体免疫印迹实验的检测限。

  (c)Exosome ELISA Kit检测限数据

  用本试剂盒对COLO201细胞源纯化外囊泡(使用MagCaptureTMExosome Isolation Kit PS)进行梯度稀释的样品以及缓冲液的空白值进行测定,制作COLO201标准曲线。利用此标准曲线可算出COLO201源纯化样品的最低检测灵敏度。(测定各浓度点n=6,空白点n=12)

  比免疫印迹实验可高灵敏度检测标记蛋白。


细胞培养上清样品的稀释线性(Linearity)参考数据

COLOC201细胞培养上清纯化外囊泡为标准品制作标准曲线,以COLO201细胞培养上清5个梯度稀释样品(1:100-1:1600)进行稀释线性进行评估。


   

  (MagCaptureTMExosome Isolation Kit PS纯化)  标准品:COLO201细胞源外泌体

  测定样品:COLO201细胞培养上清

  一抗:试剂盒附带抗CD63抗体

  良好的稀释线性,已确认可检测0.1μL培养上清的细胞外囊泡。


◆产品信息



更多应用说明,请点击:

新型亲和性外泌体纯化法与外泌体高灵敏度检测应用


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