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Thermo-又快又准，Invitrogen手把手教你“靶向”检索抗体 二维码
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发表时间：2022-06-22 15:42作者：诺扬生物来源：Thermo 既然这样，不妨跟我们逛逛赛默飞的官网，只需三步，包您找准找对抗体，抗体信手拈来，让您事半功倍。 Step一 ：迅速定位到官网首页 进入赛默飞官方网站首页（thermofisher.com），点击左边分类的下拉框，选择“一抗” 或“二抗”。
Step 二：检索工具用起来 一抗检索 1、选择“一抗”后，确定靶标/基因名称，实验应用以及需要检测的目标物种。
2、完成初步筛选后，还可以根据偶联物、宿主、克隆性、PTM（post translation modification，翻译后修饰）、克隆号、激光兼容性等等进一步锁定目标。那它们分别是什么意思呢？
偶联物 根据实验目的选择未标记一抗（Unconjugated）或直标一抗（荧光染料Alexa Fluor/FITC，生物素Biotin、辣根过氧化物酶HRP、碱性磷酸酶AP等），实现对分子的追踪。 宿主 是指生产抗体的物种。例如mouse anti-human一抗，是指借助小鼠生产出来的抗体，用于检测人源样品，那么就要搭配anti-mouse的二抗。 克隆性 也就是“克隆类型”，有单克隆抗体（monoclonal）和多克隆抗体（polyclonal）。单克隆抗体识别某一抗原的单一表位；多克隆抗体则可以识别任一抗原上的多个表位。在应用上，单克隆抗体适用于检测单个表位，且批次间或不同实验间一致性非常高，然而可能出现特异性过强导致表位丢失的现象；多克隆抗体抗则比单抗更能容许抗原的微小变化，更适用于检测变性蛋白质，不足之处是易产生批次间差异及背景信号。 PTM 指蛋白质在翻译后的化学修饰。蛋白质的氨基酸残基被共价修饰后，其理化性质、构像也会随之发生改变，显著影响蛋白的功能。常规的修饰有乙酰化，甲基化，磷酸化，泛素化等等。 克隆 也就是“克隆号“，一般是用来标示单克隆抗体的抗原表位的，克隆号一致的抗体，抗原表位是完全相同的，因此在抗原识别的各种特性上都一样。 激光兼容性 不同染料的激发波长不同。如果是偶联荧光染色，需要根据现有设备所支持的波长来选择适合的染料。 二抗检索 1、选择“二抗”后，确定宿主，靶标种属，偶联物。
2、设置好筛选条件后，单击右上角的搜索键，即可跳转到筛选结果。类似一抗的筛选过程，需要选择次级筛选条件。那它们又代表什么意思呢？
靶标种属 二抗的宿主必须不同于一抗的宿主和目标种属。大多数一抗是在小鼠或兔的体内制备，因此山羊来源的抗鼠或抗兔IgG是目前最广泛使用的二抗。 靶标类型 二抗需与一抗的类别和亚类相配合。我们提供针对 IgG，IgA，IgM，IgE和IgD的二抗；根据它们重链结构和抗原差异性又细分了抗体的亚类，例如IgG包含IgG1/IgG2a/IgG2b/IgG34个亚型。当一抗是小鼠IgG某一亚类，那么几乎所有的IgG亚型都能识别它，或者可以选择与之对应的亚型IgG。 交叉吸附 交叉吸附指经亲和纯化的二抗，再用一个固定了其他种属来源的抗体或血清的纯化柱纯化。因此这种方法获得的二抗背景更低，效价更高。 抗体形式 包括完整抗体和片段抗体。完整抗体经过片段化处理去掉某些功能结构域得到片段抗体，能显著降低FC的非特异性结合；同时分子量变小，有更好的渗透性，在免疫组化中效果更优异。 Step三：临门一脚——就是它了！ 这时候有小伙伴迷惑了：完成步骤二的多重筛选后，依然跳转出多个结果，这时候应该怎么选呢？其实，选择的原则还包括：抗体是否有高级验证标识以及其相关的数据，引用的文献以及已发表的数据，产品规格以及库存等等。这样，抗体的检索就基本完成啦。
那么，什么是高级验证呢？这是Invitrogen为了保证抗体质量而专门提供的一套严格的两步抗体验证方法：靶标特异性确认和功能应用验证。靶标特异性确认是指该抗体至少经过下述一种方法检测。相对于其他抗体厂家，Invitrogen采用更广泛更丰富的靶标特异性确认方法，力求全方位保证抗体的特异性和稳定性。
另外，功能应用验证则指抗体能在下述特定的应用中发挥性能：WB，ChIP ，IF， IHC，flow。 详情可参考官网： thermofisher.com/antibodyvalidation 抗体广泛应用于科研或工业领域的方方面面。选择“对”的抗体能大大减少实验时间和成本，达到事半功倍的效果 |
