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正能生物-mIHC试剂盒| 多重免疫组化染色TSA技术

 二维码 449
发表时间:2023-04-28 17:35作者:诺扬生物来源:正能生物
实验原理
酪酰胺信号放大(Tyramide Signal Amplification, TSA)是通过酪胺的过氧化物酶反应实现的。该技术的主要原理:酪胺非活性荧光素底物在HRP和过氧化氢的作用下,会被激活产生活化荧光底物,同时形成共价键结合位点,共价结合在蛋白抗原表面或附近的酪氨酸残基上。抗原和抗体的结合部位就会有大量的酪胺荧光素沉积,使结合位点处的荧光信号增强。
酪胺荧光素底物与抗原酪氨酸稳定的共价结合使TSA信号不会受到微波影响。因此可在实验过程用热修复法清除第一轮与抗原非共价结合的抗体复合物后(这样在抗体去除后仍能保留与抗原相关的荧光信号,再用第二种一抗进行第二轮孵育,同时更换另一种酪胺荧光素底物,多次循环反复以实现多重免疫组化染色。


01
实验方法


实验前准备:

  1. PBS缓冲液、枸橼酸钠抗原修复液(或其他修复液)及3% 过氧化氢溶液;

  2. 用于IHC-P的多个靶标一抗;

  3. mIHC试剂盒(多聚HRP二抗、TSA荧光素、TSA增强剂)

操作步骤:

石蜡切片脱蜡至水→抗原热修复→阻断内源性过氧化物酶→血清封闭→







第一个一抗孵育→对应HRP二抗孵育→添加TSA染色工作液1→微波加热处理→







第二个一抗孵育→对应HRP二抗孵育→添加TSA染色工作液2→微波加热处理→







第三个一抗孵育→对应HRP二抗孵育→添加TSA染色工作液3→微波加热处理→

……

以此循环N次→细胞核复染DAPI→封片及检测

02
TSA技术优势


提高信号放大倍数,显著增强抗原相关荧光信号;

灵敏度更高;

可微波去除一抗/二抗及非特异性染色;

减少一抗使用量,节约抗体成本;

针对每张组织切片可收集到更多的数据,实现一张切片多达6种靶标的共表达;

适合任何经IHC-P验证的抗体(同一样本中的靶标都可以选用高特异性的正能生物病理级抗体);

可在同一样本中使用同一种属来源的多种一抗进行多标记识别,例如都选用兔单克隆抗体,既避免了交叉干扰,又解决了一抗二抗种属匹配限制问题。

03
产品信息

正能提供的多重荧光免疫组化试剂盒具体酪胺荧光染料为以下其中一种或者多种:TYR-480,TYR-520,TYR-570,TYR-620,TYR-690,TYR-780。此试剂盒中的荧光染料可单独或配合使用,可以实现单标、双标、三标以及更多重荧光放大/多重同源抗体荧光标记等功能。

仅适用于石蜡切片的mIHC试剂盒

货号:18002产品规格: 20T / 50T / 100T

Goat Anti-Mouse/Rabbit Multiplex IHC Detection Kit (Double)

  • TSA-520 Dve; Ex/Em: 488/520nm

  • TSA-570 Dye; Ex/Em: 555/570nm

图片

货号:18003产品规格: 20T / 50T / 100T

Goat Anti-Mouse/Rabbit Multiplex IHC Detection Kit (Triple)

  • TSA-520 Dye; Ex/Em: 488/520nm

  • TSA-570 Dye; Ex/Em: 555/570nm

  • TSA-690 Dye; Ex/Em: 630/690nm

图片

货号:18005产品规格: 20T / 50T / 100T

Goat Anti-Mouse/Rabbit Multiplex IHC Detection Kit (Quadruple)

  • TSA-520 Dye; Ex/Em: 488/520nm

  • TSA-570 Dye; Ex/Em: 555/570nm

  • TSA-620 Dye; Ex/Em: 590/620nm

  • TSA-690 Dye; Ex/Em: 630/690nm

图片

货号:18006产品规格: 20T / 50T / 100T

Goat Anti-Mouse/Rabbit Multiplex IHC Detection Kit (Quintuple)

  • TSA-520 Dye; Ex/Em: 488/520nm

  • TSA-570 Dye; Ex/Em: 555/570nm

  • TSA-620 Dye; Ex/Em: 590/620nm

  • TSA-690 Dye; Ex/Em: 630/690nm

  • TSA-780 Dye; Ex/Em: 750/780nm

图片

货号:18007产品规格: 20T / 50T / 100T

Goat Anti-Mouse/Rabbit Multiplex IHC Detection Kit (Sextuple)

  • TSA-480 Dye; Ex/Em: 450/480nm

  • TSA-520 Dye; Ex/Em: 488/520nm

  • TSA-570 Dye; Ex/Em: 555/570nm

  • TSA-620 Dye; Ex/Em: 590/620nm

  • TSA-690 Dye; Ex/Em: 630/690nm

  • TSA-780 Dye; Ex/Em: 750/780nm

图片



高分文献引用

IF=8.6

Clinical and Translational Medicine

Integrating single-cell RNA sequencing with spatial transcriptomics reveals an immune landscape of human myometrium during labour.

引用产品: #18003

Goat Anti-Mouse/Rabbit Multiplex IHC Detection Kit (Triple)

样本: Human   |   应用: IF

图片

适用于多种实验需求(石蜡/冰冻切片,细胞爬片)的mIHC试剂盒

正能提供的新款mIHC试剂盒添加了专门的抗体洗脱试剂,只需在荧光染色反应后增加一轮抗体洗脱步骤即可满足您大部分的荧光免疫组化实验需求。

货号:18002FC产品规格: 20T / 50T / 100T

Goat Anti-Mouse/Rabbit Multiplex IHC Detection Kit(For Frozen section /Cell slides, Double)

  • TSA-520 Dye; Ex: 488nm/Em: 520nm

  • TSA-570 Dye; Ex: 555nm/Em: 570nm

  • TSA-570 Dye; Ex: 555nm/Em: 570nm

图片

货号:18003FC产品规格: 20T / 50T / 100T

Goat Anti-Mouse/Rabbit Multiplex IHC Detection Kit(For Frozen section /Cell slides, Triple)

  • TSA-520 Dye; Ex/Em: 488/520nm

  • TSA-570 Dye; Ex/Em: 555/570nm

  • TSA-620 Dye; Ex/Em: 590/620nm

  • TSA-620 Dye; Ex/Em: 590/620nm

正能·生物素-酪胺信号放大试剂盒

生物素-酪胺IHC信号放大技术可以增强目标蛋白质的信号,并提高实验的检测敏感性。正能提供的生物素-酪胺信号放大试剂盒是检测免疫细胞化学(ICC)、免疫组织化学(IHC)和原位杂交(ISH)中低丰度目标的灵敏方法。

货号:18020

TSA Biotin Kits

应用:IHC-F,IHC-P,ICC/IF

反应种属:Mouse,Rabbit

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