商城导航
  • 分子生物学
    核酸纯化
    基因组DNA提取
    质粒提取
    核酸采集与保护
    DNA产物纯化及凝胶回收
    RNA提取
    磁珠法核酸提取
    核酸纯化其他
    PCR相关
    荧光定量PCR
    一般PCR产品
    RT/PCR
    PCR其他产品
    分子标准品
    核酸电泳及其他
    DNA MARKER
    核酸其他及电泳
    RNA MARKER
    特殊标记MARKER
    克隆
    感受态细胞
    连接酶
    克隆其他
    限制性内切酶
    菌株
    质粒载体
    分子相关
    点突变及基因突变检测
    二代测序产品
    分子杂交
    分子其他
    甲基化
  • 抗体
    常用一抗
    内参抗体
    标签抗体
    二抗相关
    标记二抗
    二抗
    一抗
    综合一抗
    流式抗体
    抗体相关
    抗体标记
    流式相关试剂
    抗体同型对照
    抗体其他
  • 免疫蛋白研究
    蛋白检测
    Western Blot
    蛋白提取
    蛋白纯化
    蛋白定量
    蛋白Marker
    蛋白电泳
    免疫组化
    ELISA
    ELISA辅助
    蛋白芯片
    四聚体
    蛋白相关
    蛋白其他
    蛋白质与多肽
    蛋白/细胞因子
    免疫沉淀
    RNA/RNP互作
    IVD相关
    IVD原料
    免疫蛋白其他
    免疫蛋白其他试剂盒
  • 细胞生物学
    细胞分析
    细胞凋亡
    细胞增殖
    细胞培养与转染
    基础培养基
    细胞冻存
    细胞污染去除与预防
    3D培养
    细胞培养其他
    细胞转染
    细胞分离
    无血清细胞培养基
    NK,CIK,CAR-T产品
    干细胞产品
    抗体生产培养基
    无血清培养基配套产品
    细胞株
    细胞培养微载体
    牛血清
    其他血清
    外泌体
    外泌体提取纯化
  • 生化试剂
    染料/染色剂
    荧光染料
    染色剂
    生化相关
    生命科学
    生化试剂盒
    纯化相关
    层析填料树脂
    培养基
    酵母缺陷型培养基
    发酵
    微生物检测
    微生物培养基
    标品
    分析对照品/标准品
    其他生化
    磁珠
    通用缓冲液
    内毒素检测鲎试剂
  • 耗材
    PCR相关
    PCR耗材
    耗材其他相关
    通用耗材
    膜/过滤
    转印膜
    滤器
    膜其他
    滤膜
    滤纸
    细胞相关
    细胞培养耗材
    TRANSWELL
    流式耗材
    蛋白研究相关
    WB相关耗材
    免疫组化耗材
    激光共聚焦耗材
  • 仪器
    电泳设备
    蛋白电泳整机
    垂直蛋白电泳配件
    蛋白转印配件
    电泳其它配件
    电泳仪电源
    水平电泳配件
    水平电泳整机
    核酸分析
    PCR仪
    核酸提取仪相关
    分液相关
    移液器
ABUIABAEGAAg2cem8wUo9P7qsgQwsAk40gs

0571-86893171

工作日8:30-17:30

浅谈基础培养基的几种重要组分!

  153
Issuing time:2021-10-12 16:15

微信图片_20210916115546.jpg

前言

细胞培养市场上有不同品牌,不同种类的基础培养基,但是其配方都是大同小异,都含有几种相同的重要组分,那么我们逐一说明。


1、葡萄糖

•葡萄糖浓度代表什么?

•培养基中的葡萄糖浓度范围从1g/L(5.5mM)到10g/L(55mM)

•5.5mM的葡萄糖浓度与体内正常血糖的浓度类似

•高糖培养基可以满足肿瘤细胞等非生理状态细胞的体外培养需求

•选择高糖还是低糖培养基?

•根据不同细胞类型选择

通常原代细胞、干细胞使用低糖培养基

永生细胞系等病理状态的细胞使用高糖培养基


2、丙酮酸钠

•作用

•葡萄糖不足时为细胞提供碳源

•直接进入三羧酸循环,可以被快速利用

•什么情况下添加丙酮酸钠?

•之前培养条件已含有丙酮酸钠

•代谢旺盛的细胞

丙酮酸钠的贮存液浓度一般为50mM,-20℃保存,培养基中的终浓度为1mM。


3、酚红

•pH值指示剂

•培养基颜色的变化帮助细胞培养者判断是否需要换液等操作

•什么情况下建议选择无酚红培养基?

酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素),干预某些细胞在克隆级密度时生长。为避免固醇类反应,在干细胞培养或者进行低密度细胞生长时,应使用无酚红的培养基。


4、HEPES

•作用

•稳定pH值

•本身没有营养价值,会提高渗透压,并降低酚红对pH值的指示作用

•什么情况下需要加HEPES?

•培养条件pH波动剧烈

•细胞对pH敏感

Hepes的贮存液浓度一般为1M,常温保存。培养基中的终浓度为25mM


5、谷氨酰胺

几乎所有的细胞对谷氨酰胺都有胶高的要求。谷氨酰胺脱掉氨基后,可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。

谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20℃冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。

试验操作中常配制高浓度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支),分装使用,-20℃保存。使用时,每支1ml的谷氨酰胺加入到99ml完全培养基中,使其终浓度为2mM培养基。

误区:培养基中的谷氨酰胺容易降解,需要不断补充

正确方案:如果正确使用,一般不需要补加,如:4℃避光保存;分装,不要反复预热。


6、NaHCO3

•作用

与CO2一起形成缓冲系统,保持培养基PH值稳定。


7、GlutaMAXTM

•GlutaMAXTM 完美替代L-谷氨酰胺

•极为稳定,可常温、2~8℃以及-5~-20℃保存

•毒性氨积累最小化

•使细胞的性能达到最佳

•提高细胞成活和生长

•建议不要将其用于昆虫细胞培养

•由于释放谷氨酰胺有一定的延迟,不建议用于刚复苏的细胞


—————————————————————————————————
0571-86893171

order@ny-bio.com
浙江省杭州市江干区新塘路672号中豪五星国际商业中心
在线客服
 
 
 Work Time
Mon to Fri :8:30-17:30
 Contact Details
微信:nuoyang004
 
 
 
 
Login
Login
Login by:
My Profile
My Collection
0
leave a message